真菌药敏试验那点事

二、什么情况下做药敏试验？

1、阴道分泌物念珠菌是否做药敏试验？

明玉 15:06

阴道分泌物的念珠菌各位同仁做药敏吗？用何试剂？参考何种判读标准？

虫子迈克 15:08
不做

邓通洋 15:09

吴老师我们不做，曾经试过做，发现意义不大，于是暂时放弃了，以前用的是梅里艾的，折点参照说明书。

颜 15:23

阴道分泌物我们没有做药敏，只是无菌体液做，尿液视情况而做一一量和纯度。试剂我们也用的F3。具体阴道分泌物的问题求指教哦

廖国林 15:28

以前用的是ROSCO药敏纸片，判读标准也是其提供，现在没做了

王萍 15:36
念珠菌性阴道炎治疗大多是用栓剂粘膜吸收，通常不用做药敏

明玉 15:48
因为复发性的念珠菌感染一直是个比较困难的问题，而里面有一些可能是非白念，我的观点也是不用做药敏，告诉临床是白念还是其他念珠，然而实际临床有时又总有些需求，而且妇科用的药基本很多也无法做药敏，各位医院的情况呢？专业共识是？

叶子 16:03
复发性念珠菌，我院已结题一课题帮助了许多有疾患的女士，内里有许多治疗的细节～

明玉 16:07
都与我们培养和药敏无关了？@叶金艳 浙江省嘉兴市妇幼保健院 

王萍 16:07
念珠菌性阴道炎的复发不是耐药而是治疗疗程的问题

名扬 16:13
念珠菌阴道病治疗中耐药发展的几率不高，而且抗真菌治疗不是念珠菌性阴道炎的主要治疗方式，我们临床医生有时也会要求，但都被回绝了，没有必要。

叶子 16:18

是的，与治疗的流程有关。具体我请教临床再答复您～。

---

王瑶：

目前真菌的药敏折点还没有针对阴道炎的，所以实际上难以指导临床用药。霉菌性阴道炎妇科常用局部用药药物主要包括布康唑、克霉唑、咪康唑、特康唑、噻康唑、制霉菌素等，但这些药物CLSI和EUCAST均无折折点，只有少数患者会口服氟康唑或伊曲康唑治疗。但医生又希望能有一个参考，尤其是对于一些复发性、难治的霉菌性阴道炎，所以我们只针对生长++以上的光滑、克柔提供药敏，其实也只是起个提示作用，提示氟康唑的敏感性可能降低。ROSCO纸片种类较多，对补充药物各类是一个比较好的选择，但也存在折点是否适于阴道炎的问题。

---

2、痰标本分离的念珠菌是否做药敏试验？

眼镜 15:18宁老师你好，看了您分享的规范报告，受益很大清楚了很多各自为正的不正规报告。在没有这个群平台时，很多东西都是在前辈们言传身教留下的，在这个平台里与时俱进了。但还是有点不清，如痰培养，培养白念2-3+，这种我们就报告了，我看群里有的老师说不该报告，但我觉得是否应该结合临床报，因为我们报告了医生用药也有效了，今天看了规范说，痰只报丝狀真菌，可丝狀真菌在痰里很少见呀！请教了

lydia 15:28
痰培养白念2+以上，我们也报了，我们这里临床好像也需要的 ，不知是否有统一标准 

wlp 15:34
@痰培养白念我们是长的比正常菌群多的报的，同时结合痰涂片结果，如果都是上皮细胞的不报。

lydia 15:36
嗯，谢谢；我们细菌室定2+以上报，不知是否合适？  

海的宁子 15:37感谢深入交流与思考。1一般而言，痰的念珠菌分离株，不必鉴定药敏。2 特殊情况如纯（罕见），或对免疫低下患者痰中超过正常菌群的念珠菌分离株，可以报。但意义需要仔细衡量。念珠菌性气管支气管炎也可以报，临床诊断在前。3 具体个例报告和有效不能否定整体规律。而且，很多医生不会判断肺部病原和治疗效果。导致所谓的治好要打折扣。4 指南，idsa 念珠菌指南和cdc院感标准，可以参考

眼镜 15:41

谢谢宁老师，那对于儿童鹅口疮怎么报？该不该报？

海的宁子 15:42

鹅口疮是上呼吸道感染。痰标本不适用。送白膜本身，镜检，鉴定，药敏

瑶 20:20
一般大家可能比较关注痰标本酵母菌处理的情况，由于呼吸道的酵母菌以定植为主，真正的原发性念珠菌肺炎罕见，所以一般痰标本酵母菌我们只是报告半定量， +++以上才进行鉴定，一般不做药敏试验。只有特殊情况下才考虑，比如念珠菌血症继发感染？患者有食管气管漏，念珠菌移行到呼吸道等情况，这需要与临床密切沟通后才做

蓝月亮_王月玲 20:23
痰涂片合格镜下见到孢子和菌丝要做药敏吗？

瑶 20:31
痰涂片里看到的如果是酵母样的孢子和假菌丝，也只是能提示有菌存在，多数仍然是定植，不建议以此为标准判断是否做药敏

椰风雨林 20:28
 王老师，血液科的患者，免疫力低下，痰图片合格，见到孢子，培养+++，也是需要结合临床再做药敏么

瑶 20:33
血液科的患者是真菌感染的高危人群，要关注是否存在多部位同一种念珠菌定植，比如痰、尿、导管等如果都有白念，这是一个危险信息，要跟临床医生进行沟通，可以提供药敏结果供预防性用药参考。但常规不建议都做。

爬楼学习好辛苦，休息一下再继续学习下半场吧！

三、酵母菌药敏试验

瑶20:13

看了大家的发言记录，感觉常规开展酵母菌药敏试验的单位还是挺多的，以ATB方法最为常用，也有使用国产仪器的单位。而且大多数单位也是针对无菌部位分离出的菌株进行药敏检测。

名扬 20:21
其实针对ATB的判读大家都存在一定的误区，尤其是针对生长分数来判断药敏情况，不同的药敏其判断方式是存在差异的，比如5FC和AMB的判断生长分数是0，而FCA与VRC的判断分数则是2,其实ROSCO纸片法也是这样。有时候是针对针对其评判分数的判断，不同老师存在较大的差异性，会导致结果的不稳定性。最难判断的就是1和2，恰巧1和2又是判断的关键点。

瑶20:39

酵母菌的药敏难点在于结果的判读，感觉ATB的评分判读方法还是基本跟CLSI的指南要求一致的，有异曲同工之妙，关键在于检测孔与生长对照孔的比较和把握。

项少龙2007 20:42

是的，应该是指拖尾现象。实验室人员应该多在一起共同判读，统一标准。

晨雨best（刘利华） 20:46
@王瑶.北京协和医院老师弱弱的问一句异曲同工之秒您是怎么做的？

瑶20:50

我理解0分就是不生长100%抑制，1分就是CLSI说的微弱生长，2分约等于50%抑制即明显抑制，3分相当于显著抑制约80%抑制，4分无生长抑制。利用药敏质控株进行训练，是很好的培训方法。

吴庆 20:47

fungus3大家的折点是按说明书，还是？

瑶 20:48
我们是按照CLSI的标准进行判读的

---

---

吴庆 20:54 其他药呢？

瑶 21:03
没有最新折点，老版本5FC和伊曲康唑也是有念珠菌属折点的，但新版没有更新种特异性折点

朱焱 21:11

@王瑶-北京协和医院YEASTONE你们现在有用吗？

胖虎 21:32

请教王老师，Yeastone药敏板现在有产品注册证吗？

瑶21:33
yeastone我们只用于研究，常规使用成本太高，已经有证了

金色阳光 21:26

某些念珠菌24小时无法判读结果，但48小时用全部生长，您是如何掌握的？

瑶21:30
以生长对照充分生长的时间为宜，如果24h对照已经长起来了，还是24h为好，长到48可能拖尾就变成假耐药。但如果生长对照24h没长起来，还是要继续培养

名扬 21:02

如果48h后仍旧无法很明确的判读（部分药物比如VRC或ITR），王老师，你们会作何处理？用其他方法验证，还是估摸着报告？

瑶 21:08

绝大多数和生长对照比较后，还是可以判断的。极个别如果拿不准是拖尾还是真的耐药，而且标本来源也很重要的菌，可以做Etest对照一下

颜 21:05 就是感觉仪器判读不咋么的靠谱

瑶21:18

您是指ATB吧，的确仪器法不能准确的识别拖尾，如果仪器判定耐药的，一定要人工进行确认。关于这一点我们进行过评估，而且也与厂家的法国专家沟通过，他们也是这样建议的

yujuan22:17 隐球菌的有折点吗？

瑶22:21 目前CLSI和EUCAST没有隐球菌折点

四、丝状真菌药敏试验

吴庆 20:23

王老师，你们丝状真菌都做药敏的？那鉴定和药敏同时发的，还是鉴定先发出去？

瑶 20:29

丝状真菌我们一般是先把鉴定发出去，后发药敏。能早给临床一点信息，就早一点。我们的鉴定和药敏是两张报告单

项少龙2007 20:33

微生物的培养鉴定工作，一方面要强调快速，准确，实现三级报告制度。另一方面，还有关注培养慢的微生物，比如，丝状真菌。单纯的强调第一方面，必然有很多的漏诊。我以为，还是要强调涂片的重要性，对于原始标本，尤其是分泌物组织，涂片看的更仔细，看到可疑的微生物，包括真菌，这样可疑有的放矢地做特殊的培养。

瑶 20:36

标本直接涂片发现真菌丝，比培养阳性更具诊断价值，因为培养存在污染可能，而涂片污染可能性很小

项少龙2007 20:38

涂片和培养的阳性结果，我认为意义比做药敏重要的多，药敏的意义是发现不可预测的耐药。真菌的耐药性变化比细菌的要小的多。

项少龙2007 20:51
真菌病的诊断本身就是现在医学的难点，尤其是丝状真菌。培养和非培养方法，甚至是CT等影像学诊断都不能很好的解决这些难题。我们要做的是一方面做好实验室的工作，另一方面还是要尽可能的了解临床的其他检查结果，和临床沟通。尽量站得高一点看问题。最终的判读还是要归于临床和对病人的临床治疗效果。

名扬 20:42
培养存在较高污染性，但是涂片存在较低的阳性率，所以个人认为应该综合各种指标来进行丝状真菌的诊断，今天做了三个肺泡灌洗液GM值都是在5.0以上，且CT具有较为典型的改变，但真菌涂片都是阴性的，培养还存在时间长的缺点。

金色阳光 21:46

您针对何部位分离的丝状真菌做药敏？

瑶 21:57

丝状真菌培养的污染也是有可能的，尤其是呼吸道标本，所以所有培养阳性的丝状真菌我们都要给临床打电话，询问临床情况并建议复查，只有临床觉得有意义的我们才会做药敏

晨雨best（刘利华） 21:42

Etest实验目前来没有普及，大部分医院不做丝状真菌药敏！不同的丝状真菌怎么针对性的选择Etest试纸药敏？

瑶 21:45

建议参考热病、ABX指南、国家微生物治疗指南等，真菌的药敏表型还是比较有特点和规律的，所以不常规做丝状真菌药敏的话，把鉴定做好也是很棒的用药指导

名扬 21:44

王老师你们的镰刀药敏如何，还有就是局部性的感染如眼科等，其用药应该和系统性感染有区别，现有没做药敏情况下如何进行临床抗真菌药物指导？

瑶 21:55

镰刀菌一般只做两性B和伏立就可以了，系统用药推荐这两种药物。但是据我了解临床局部用药只有两性B和那特真，全身用药治疗的病例也有但比较少

名扬 20:34

你们丝状真菌E-TEST操作是否需要在生物安全柜内操作？

瑶 20:34
丝状真菌的鉴定药敏等操作都应该在安全柜里进行

颜21:03

您们是如何做丝状真菌的药敏呢？具体如何配菌悬液，以及浊度要求呢？

瑶 21:16

孢子菌悬液：使用点种的纯培养平皿或斜面，使用无菌生理盐水冲洗菌落表面，将菌悬液转移至螺口无菌试管中，涡旋震荡后静至15min，使用无菌盐水将上清液调整至接种浓度

---

以上来自于Etest的厂家说明

---

吴庆 21:36 王老师的药敏平板是自配的，还是买的？

瑶 21:37 自制的1640

吴庆 21:39 王老师，能不能分享一下，你们做的丝状真菌的药敏结果呀？

瑶 21:41

感觉近几年伊曲康唑的耐药性上升较快，也许是协和的疑难病例比较多，可能耐药情况比其他医院严重一些，但伏立、两性保持着较高的敏感性。协和的药敏不具有典型代表性，建议大家一般还是可以参考热病或ABX等指南经验性选择用药，真菌耐药突变的整体情况还是远远低于细菌的

---

由于目前没有CLSI的曲霉折点，发一个EUCAST折点共大家参考

---

晨霞 22:06

丝状真菌药敏实验可以用KB法吗？虽然KB法没有判定标准，但只报抑菌圈直径，不报结果可以吗？

瑶 22:09

可以做的，CLSI M51-A

何绍 22:28

王老师，皮肤毛藓菌，丝状菌能做药物吗？用什么方法做？

瑶 22:29 微量肉汤稀释法是有指南的，在M38-A2里有专门介绍皮肤真菌的药敏试验方法，遗憾的是缺乏折点。

作者：王瑶 北京协和医院

责任编辑：杨乐园，审核：银教授

未经允许不得转载，转载时需注明出处与作者。

长按上图，识别二维码关注

一更多精彩一