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家禽血液采集、保存及送检的技术与方法

2023-05-25 17:04:50

随着我国养鸡业日益向规模化、集约化方向发展,鸡病也呈现出新的特点,如混合感染增多,病症复杂化和非典型化。为了给疾病的预防、控制、净化提供技术支持,必须执行日常疫病监测制度,在此过程中,鸡的血液采集是一项重要的常规性和前提性工作,准确快速的采血技术可以减少鸡只应激,避免造成鸡只不必要的死亡,还可使监测结果更为可靠。血样的采集看似简单,但真正操作起来,其难度和强度较大,集专业知识和操作技巧于一体。笔者结合长期的临床实践,主要针对与鸡采血技术相关的问题进行介绍。

  一 主要器材

  5mL一次性塑料注射器、试管、试管架、5%碘酊棉球、75%酒精棉球、干棉球、标签纸、记号笔、相关表格等。

  二 采血前的准备工作

  采血人员必须2人以上,需经过专业培训,熟练掌握采样技巧,并遵循严格的无菌操作规程。兽医人员到鸡场采样时,要严格遵守鸡场消毒防疫等相关规定,口罩、乳胶手套、防护帽、防护服、防护鞋穿戴整齐后方可进入现场。

  采血的地点和时间应符合要求。采血场所应有充足的光线。夏季室温最好保持在25℃~28℃,冬季则在1 4℃~20℃。如果鸡处于产蛋期间,最好等到下午大部分鸡产完蛋后采血,以免应激反应引起产蛋下降。

  采血时用的注射器和试管保持清洁干燥,并且注射器要有足够的强度、使用灵活且方便可靠、外包装未破损、在有效期内使用。

  三 采血方法

  采血方法的选择,主要取决于采血的目的、所需血样或血清的数量以及鸡的日龄等,视实际情况而定。凡用血量较少的检验,如血涂片.可刺破鸡冠取血;用中等量血时,可以从静脉血管采集,如检测血清中禽流感、新城疫抗体效价;当需血量较多时,可以从心脏采集,如配制鸡红细胞悬液。雏鸡可采用跖骨内侧静咏采血法、颈静咏采血法;青年鸡、育成鸡比较多的应用翼下静脉采血法、心脏采血法。

  1 鸡冠采血法

  多用于采血量较少的采血,用针头刺破鸡冠即可。吸取血液时用手挤压鸡冠一次,毛细管可吸取30~80ul血液。此法操作简便,但采完血后要用浓碘酒涂抹伤口止血,既预防感染,又能制止因出血而引起的啄冠。

  2 颈静脉采血法

  鸡右侧颈静脉较左侧粗,故常采用右侧颈静脉采血。左手以食指和中指夹住鸡头部,并使头偏向左侧,无名指、小指和手掌握住躯干、拇指轻压颈椎部以便静脉充血怒张。常规消毒后,右手持注射器,针头倾斜45。沿血管方向一侧0.3~0.5cm刺人静咏,再与血管平行进针0.2~0.5cm抽取血液.采血完毕后,压迫伤口处止血。

  3 跖骨内侧静脉采血法

  鸡跖骨内侧静脉采血法适合于雏鸡,其优点是易于保定,血管位置明显,并且血管游离性小。

  助手一手固定两翼根部,另一手固定一只脚,按住跖骨内侧的静咏,此时脚部静脉突起,常规消毒后,右手持注射器与跖骨皮肤呈10。顺血管方向进针取向。跖骨内侧静脉采血是向心方向,采血时进针角度不能太大,回抽活塞的速度要特别缓慢。

  4 翼下静脉采血法

  翼下静脉采血法是鸡的采血方法中最常用的。采血时,最好有助手保定鸡。助手左手抓鸡的两只脚,右手抓鸡的两只翅膀,将鸡侧放于地面,并用大拇指压迫翅膀根部静脉,使静咏充分充血,以方便采血操作。采血者用酒精棉球消毒翅静脉窝区后即可进针,稍稍将针头轻插进血管,轻拉话塞,注意观察针筒内有无血液被吸出,当发现有血液开始被吸出时,必须保持注射器位置不动,让血液缓缓吸人注射器针筒内,达到所需的采血量后,助手用干棉球压迫血管上的伤口约30秒止血。

  压迫翅膀根部静脉血管时,不能用力太大、压得太紧,否则造成血管充血过分,针头容易滑出血管。

  进针技巧要掌握好。为避免血液直接流出体外造成鸡体失血过多,在距离静脉窝大约0.3cm处,使针管与近心端血管的夹角为45。,进针最好是将针头的切口面向上,针头轻挑起表皮,由表皮与肌肉之间的空隙,往血管的远心端方向推针前行至血管上面,再将针管与血管重叠成一条直线刺入血管。进针不宜过深,如刺穿血管,皮下很快血肿,采血失败。

  要注意针头方向。在采血中出血顺畅,固定针头不动,轻拉活塞抽血2mI左右。如果发现很快不出血,可将针头左右旋转,同时轻拉活塞直到抽出血,防止血管壁吸住针头,导致血流受阻。

  翼下静脉采血时,抽血速度要保持缓慢,静咏血管回血流速慢,内压突然降低易使血管壁接触针尖而阻塞了针头,影响采血。

  若需要反复多次采血,应自离心端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。

  翼下静脉采血前一定要用酒精棉球消毒,酒精有扩张血管作用。采血完毕,要用干棉球压迫采血部位,不要用酒精棉球,因为酒精会引起溶血,造成血液凝固不良,不利于止血。

  5 心脏采血法

  鸡心脏采血对心脏有损伤,也易伤及肺脏等其他脏器,引起内脏出血,影响鸡的生长发育,甚至会造成死亡,特别是雏鸡,常因针头刺破心脏和肝脏导致出血过多而死。心脏采血虽然难度大,但是采血速度快、血量多、效率高,适宜于多量血液时使用。鸡心脏采血有侧卧法和仰卧法。

  侧卧采血法:助手右手抓住鸡双腿,左手握住两翅膀,使鸡右侧卧,左侧面向上,放在小桌子上。采血者自龙骨突起前缘引一直线到翅基,再由此中点向髓关节引一直线,此线前1/3和中1/3的交界出有一凹陷,即是心脏采血进针部位。或者寻找由胸骨走向肩胛部的皮下大静脉,心脏约在该静脉的分支下侧,有时用食指触摸可感觉到心脏跳动。用酒精消毒后,以碘酊标记采血部位。7#针头刺入时,如触及胸骨可稍拔出,针头向右偏一点避开胸骨,再将针头向里刺入,边刺边抽动活塞,若剌人心脏,便有血液涌入注射器。术毕,局部消毒。

  仰卧采血法:鸡仰卧保定,鸡头部朝向采血者,并使颈部及两腿伸展,拔去胸上部少许羽毛,用手指在胸骨上方,嗉囊下方摸得一凹窝,局部常规处理,右手持7#针,自胸骨上方凹窝斜向前下方心脏方向,与鸡躯体成45。刺入,边剌边抽动活塞,若刺入心脏,便有血液涌入注射器。术毕,局部消毒。鸡仰卧采血应在嗉囊空虚时进行,较为方便。

  四 鸡采血时的注意事项

  采血时做好现场记录,规范填写采血表格,包括鸡场名称、鸡的品种、日龄、样品数量、免疫情况等项目,每份样品做好标记,严防损失、混淆和污染。

  采血量要根据检测要求采取。样品布点应符合代表性、准确性、合理性和科学性的原则,一般一个批次的鸡群至少采集15份样品。采集的样品应涉及不同的鸡舍,同一鸡舍的四个角落、中间位置都要采集血样,这样才具有说服力。

  采血留下的废弃物,进行集中焚烧或深埋等无害化处理。

  五 血液样品的保存与送检

  采集到血液后,应立即将针头拔掉,把注射器内的血液沿着试管壁徐徐注入,不能有气泡,也不能振荡。逐一编号,仔细核对,倾斜放置。

  血液样品夏天在常温下,冬天在25℃~37℃温水中放置1h左Z右,即可析出血清,血清析出后需冷冻保存。

  采集制作鸡红细胞悬液时,5mI注射器里应先放入2mL抗凝剂,抗凝剂用3.8g柠檬酸三钠溶于100mL蒸馏水中即可。

  血液样品送检时,在保温箱中加适量的冰块防止血液变质,送检过程中尽量防止剧烈振荡。

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