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一、血液生理概要
1.血液组成
2.血液理化性质
①血量：正常人血量约为（70±10）ml/kg体重，成人约4～5L，约占体重的6%～8%。小儿血量与体重之比略高于成人，男性比女性血量稍多，但女性妊娠期间血量可增加23%～25%。
颜色：血液的红色来自红细胞内血红蛋白。动脉血氧合血红蛋白含量较高，呈鲜红色；静脉血还原血红蛋白含量高，呈暗红色。严重贫血者血液红色变浅。严重一氧化碳中毒或氰化物中毒者血液呈樱红色。
②酸碱度：pH7.35～7.45。
比密和渗透量
①血液比密：正常男性约为1.055～1.063，女性约为1.051～1.060，相对黏度为4～5；血浆比密约为1.025～1.030；血细胞比密约为1.090。血液比密与红细胞含量、红细胞内血红蛋白含量有关：血浆比密和血浆内蛋白浓度有关。
②血浆渗透量：正常人约为290～310mOsm/（kg·H20）。
3.血液特性：悬浮稳定性、黏滞性（纤维蛋白原、球蛋白）、凝固性。
4.血液生理功能：具有运输功能、协调功能、维护机体内环境稳定和防御功能。
血液组成
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血液标本类型
① 全血 适用于临床血液学检查。
② 血浆 全血+抗凝剂+离心 适用于内分泌激素、血栓与止血检查。
③ 血清 全血+离心（静置） 适用于临床化学和免疫学检测。
不加抗凝剂，血清缺少某些凝血因子，如凝血因子Ⅰ（纤维蛋白原）、Ⅱ（凝血酶原）、Ⅴ、Ⅷ等。
血浆与血清的区别
【口诀】：血浆抗凝出凝血
血清清白缺因子
二、采血方法
（一）静脉采血法
1.概述
通常采用肘部静脉、手背静脉、内踝静脉或股静脉。小儿可采颈外静脉血液。为避免血小板激活，要使用塑料注射器和硅化处理后的试管或塑料试管。
（二）皮肤采血法（毛细血管采血法）
皮肤采血法曾称为毛细血管采血法，是采集微动脉、微静脉和毛细血管的混合血，同时含细胞间质和细胞内液。
1.概述
部位→手指（WHO推荐左手无名指指端内侧）和耳垂。
耳垂采血痛感较轻，操作方便，但血循环较差，受气温影响较大，检查结果不够恒定（如红细胞、白细胞、血红蛋白和血细胞比容等测定结果比手指血或静脉血高），一般情况下不宜使用。手指采血操作方便，检查结果比较恒定。
2.操作方法
（1）准备：取合适试管，加适量稀释液。取微量吸管和乳胶吸头相连，检查连接处是否漏气，或取一次性微量吸管备用。
（2）按摩：轻轻按摩左手中指或无名指指端内侧，使局部组织自然充血。
（3）消毒：用75%乙醇棉签擦拭采血部位，待干。
（4）针刺：用左手拇指和食指固定采血部位使皮肤和皮下组织绷紧，右手持一次性消毒采血针自指端腹内侧刺入，深度2～3mm，立即出针。
（5）拭血：待血液自然流出后，用无菌干棉球擦去第1滴血。
（6）吸血：用一次性微量吸管吸血，然后用无菌干棉球压住伤口止血。如血流不畅，可用左手自采血部位远端向指端稍施压使血液流出。
（7）稀释：用无菌干棉球擦净微量吸管外部，将吸管伸入装有稀释液的试管底部，慢慢排出吸管内的血液，并用上清液冲洗管内余血2～3次，最后将试管内的液体混匀。
3.注意事项
●所选择采血部位无烧伤、冻疮、发绀、水肿或炎症等。
●本试验具有创伤性，必须严格按无菌技术操作，防止采血部位感染，做到一人一针一管，避免交叉感染，最好用一次性器材。
●皮肤消毒后，应待75%乙醇挥发后采血，否则流出的血液扩散而不成滴。
●因第1滴血混有组织液，应擦去。如血流不畅切勿用力挤压，以免造成组织液混入，影响结果的准确性。
●进行多项检查时，采血的顺序依次为血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定、白细胞计数等。
【口诀】
静脉肘部是首选，放血别忘拔针头，
皮肤通常选手指，婴儿趾或足跟，
多项检查小板先。
（三）真空采血法
真空采血装置有套筒式、头皮静脉式两种。真空定量采血容器，根据需要标有不同的色码，适于不同检验项目。
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常用彩色真空采血容器的用途
盖子颜色 | 添加抗凝剂 | 注意事项 | 用途 |
红色 | 无 | 凝块形成约30min | 化学、血清学、血库 |
紫色 | EDTA | 须颠倒混匀6～8次 | 全血细胞计数（CBC） |
淡蓝色 | 枸橼酸钠 | 须颠倒混匀；血液与抗凝比例为9:1 | 凝血检查（PT、APTT、因子测定） |
绿色 | 肝素钠、肝素锂、肝素铵 | 根据实验需要，选择不同类型的肝素 | 化学 |
灰色 | 氟化钠、草酸钾 | 不能用于其他化学检查 | 葡萄糖、糖耐量、乙醇浓度 |
黄色 | 多茴香脑磺酸钠 | 须颠倒混匀8次 | 血培养 |
黑色 | 枸橼酸钠 | 血液与抗凝剂比例为4:1 | 血沉 |
质量控制
1.患者：患者活动情况、精神状态、药物、年龄、性别、种族、样本采集时间、吸烟、季节等都会影响检测结果。
2.采血：止血带结扎时间应小于1分钟，如超过2分钟，大静脉血流受阻而使毛细血管内压增高，使分子质量＜5000的物质逸入组织液，或缺氧引起血液成分的变化，使检查结果增高或减低。
3.溶血：因容器不洁、接触水、强力振荡、操作不慎等可引起溶血，使红细胞计数、血细胞比容、血浆或血清化学成分（如钾、镁、转氨酶、胆红素）等多项指标检验结果发生变化。
4.样本处理：血液样本采集后应立即送检，并尽快进行检查，样本保存不当直接影响实验结果。
5.实验结果分析：分析结果时，应考虑药物、饮食等因素对结果的影响。同时，应密切结合临床。
三、抗凝剂选择
1.乙二胺四乙酸（EDTA）盐
常用有钠盐（EDTA-Na2·H2O）或钾盐（EDTA-K2·2H2O）。
① 抗凝原理：螯合钙离子。
② 使用方法：量为1.5～2.2mg/ml血液。
③ 适用范围：对血细胞形态、血小板计数影响很小。适用于血液学检查，尤其是血小板计数。但钠盐溶解度低于钾盐，有时影响抗凝效果。
根据国际血液学标准化委员会（ICSH）建议，CBC抗凝剂用EDTA-K2·2H2O。不适于凝血检查、血小板功能试验。
2.草酸盐
① 抗凝原理：草酸钙沉淀。
② 适用范围：双草酸盐。
血细胞比容、CBC、网织红细胞计数等检查，不适于血小板计数、白细胞分类计数。
草酸盐对凝血因子V的保护作用差，影响凝血酶原时间测定，而且草酸盐与钙结合后形成的沉淀物，影响自动凝血仪检测结果，因此，草酸盐不适于凝血检查。
双草酸盐抗凝剂：草酸钾可使红细胞体积缩小，草酸铵则可使红细胞胀大，两者按适当比例混合，恰好不影响红细胞形态和体积。
3.肝素
①抗凝原理：加强抗凝血酶（AT）灭活丝氨酸蛋白酶，从而阻止凝血酶形成，并阻止血小板聚集等作用，从而阻止血液凝固。
②使用方法：每毫升血液肝素用量为（15±2.5）U，多为肝素钠盐或钾盐。
③适用范围：红细胞渗透脆性试验，肝素可引起白细胞聚集，瑞氏染色后产生蓝色背景，不适于CBC、细胞形态学检查。
4.枸橼酸盐
①抗凝原理：能与血液中钙离子结合形成螯合物。
②使用方法：配成109mmol/L的浓度。
1:9------凝血
1:4------红细胞沉降率
③适用范围：凝血、红细胞沉降率、输血保养液。
